ELISA实验指南（17）之该如何选择ELISA的检测方法呢（六）

1. 场景C

      在这里，前两篇文章提到的两种情况的所有可能性，加上生产第二种(豚鼠)抗纯化抗原的血清都存在。这使得双夹心法竞争性测定得到发展，使用兔子或豚鼠作为捕获血清或与相关抗种属结合物的检测物。

      不同的物种可能有更好的性质作为捕获试剂，也表现出不同的特异性。这可以在棋盘滴定实验中进行评估，而且是相关的，因为我们需要牛血清的检测和滴定结果，以便竞争阶段依赖于一种预先滴定的抗体的中断，这种抗体尽可能接近牛血清与抗原的反应。兔或豚鼠血清与牛血清相比，其特异性可能有所不同。

2. 进一步讨论

      在前面的文章里介绍过的直接法ELISA竞争性测定方法，可能是不合适的，因为拥有原始抗原(原因已在前面描述)。然而，如果能证明有足够的抗原可以附着，并且牛血清能产生特异性反应(而不是通过对粗抗原中污染物的过量抗体)，那么我们就可以建立基于该系统的检测。这需要鉴定阳性的牛血清，并用酶标记该血清。

      使用酶标阳性牛血清更有实用价值。血清可用于捕获，特别是作为IgG的部分和检测。以这种方式，竞争性分析如小标题2.6.1所示。是可行的，并可能具有优势，因为所竞争的反应是同源的(牛抗体对抗原)。这通过使用疫苗产生的第二种抗血清避免了并发症。该系统检测抗体已标记，适用于检测其他牛血清的竞争情况。因此，一个试剂相对较少并且能够用酶标记抗体的工作人员可能有足够的材料来进行分析。对系统可能性的简要描述主要集中在抗体检测上。请注意，大多数评论都与抗原检测有关。

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